Лекция 11 Аминокислоты алифатического ряда. Аминокислоты алифатического ряда и их производные

Скачать 1.12 Mb.

Название	Аминокислоты алифатического ряда и их производные
Анкор	Лекция 11 Аминокислоты алифатического ряда.doc
Дата	22.04.2017
Размер	1.12 Mb.
Формат файла
Имя файла	Лекция 11 Аминокислоты алифатического ряда.doc
Тип	Документы #1494
страница	3 из 4

1 2 3 4

Подлинность

ИК- спектр
удельное вращение растворов препаратов
для АЦЦ - Т°пл

Цистеин ФС

реакция с нингидрином на аминокислотный остаток – красное окрашивание (аминокислотная группа).

реакция Легаля (нагревание в щелочной среде с нитропруссидом натрия) на меркапто(тио)-группу фиолетово – красное окрашивание

Ацетилцистеин ФС

реакция с нингидрином отрицательная (аминогруппа блокирована)

Реакция отличия от цистеина. После кислотного гидролиза (амидная группа) в присутствии калия дихромата (или бромата калия), при взаимодействии с этиловым спиртом и конц.серной кислотой, образует этилацетат (фруктовый запах сложного эфира).

Или

HS – CH₂ – CH – COOH (K₂Cr₂O₇)

│ продукты окисления цистеина + CH₃COOH

NHCOOCH₃ HOH, H₂SO₄ > t^o

H₂SO₄ > t^o

C

H₃COOH + C₂H₅OH CH₃COOC₂H₅ + H₂O

Реакция с хлоридом железа (III) появляется синее окрашивание, которое при взбалтывании быстро исчезает (меркаптогруппа).
Реакция с нитритом натрия, красное окрашивание меркаптогруппа).

Чистота

прозрачность и цветность водного и солянокислого раствора – оба они должны быть прозрачными и бесцветными
в ацетилцистеине должна отсутствовать примесь хлоридов, в цистеине допустима в пределах эталона
в пределах эталонаобщие примеси – сульфаты, железо
Предельное содержание - сульфатная зола и тяжелые металлы.
потеря в весе при высушивании не более 0,5%

Количественное определение

Йодометрический метод. Метод основан на окислении меркапто (сульфгидрильной) группы серосодержащих аминокислот 0,1н раствором йода в кислой среде. Общая схема:

Вариант обратного титрования цистеина. При окислении йодом образуется дисульфид – цистин. Реакция проводится в среде хлороводородной кислоты (1 моль/л), при пониженной температуре (3 ^о С - ледяная баня), в течение 20 минут, в темном месте. Затем избыток йода титруют раствором натрия тиосульфата, (индикатор - крахмал). Параллельно проводят контрольный опыт.
C

H₂ – SH CH₂ – S S – CH₂

│ │ │

C

H – NH₂ + I₂ CH – NH₂ H₂N – CH + 2HI

2 │ │ │

COOH COOH HOOC

Цистеин Дисульфид-цистин

I₂ + 2Na₂S₂O₃ 2NaI + Na₂S₄O₆

Ацетилцистеин определяют аналогично, но в сернокислой среде.

ФС вариант прямого титрования в сернокислой среде и без индикатора

C

H₂ – SH CH₂ – S S – CH₂

│ │ │

CH– NН –СОСН₃ + I₂ CH – NH –СОСН₃ CH– NН –СОСН₃ + 2HI

2

│ │ │

COOH COOH HOOC

К стех. = 2/1 раствор I₂ 0,1н приготовлен с учетом условных частиц (УЧ ½ I₂)

f экв = 2/1 · ½ = 1, или сера (II) окисляется до серы (IV).
М.э = М.м·½ Т = Ст-та · М.э / 1000
Алкалиметрический метод в водной среде нельзя использовать для соединений! содержащих SН-группу, т.к. эта группа проявляет кислотные свойства частично титруется натрия гидроксидом, получаются завышенные результаты.

Хранение в хорошо укупоренной таре, в сухом, прохладном, защищенном от света месте.

Применение АЦЦ – муколитическое (таб, раствор для инъекций, раствор для ингаляций). Цистеин – в виде 5% раствора для электрофореза, при катаракте. При катаракте – для просветления хрусталика.

ФП Метионин Methioninum(ЛН) Methionine(МНН)
_{4 3 *2 1}

H₃C– S – CH₂ – CH₂ – CH – COOH

│

NH₂

D.L – 2-Амино-4-метилтиобутановая кислота

(D.L – 2-Амино- γ -метилтиомасляная кислота)
Получение

Схема синтеза метионина аналогична схеме получения кислоты глутаминовой. Исходный продукт также ацетиламиномалоновый эфир, который конденсируется с β-метилтиоэтанолом H₃CS-CH₂-CH₂OH.

получение β-метилтиоэтанола:

Описание

белый кристаллический порошок с характерным запахом. Трудно растворим в воде, растворим в разведенных минеральных кислотах и растворах щелочей и аммиака, растворим в растворе карбоната натрия (амфотерность).

Метионин не обладает оптической активностью, т.к. является рацематом (смесью D и L – изомеров).
Подлинность

ФС реакция с нингидрином
ФС для обнаружения тиометильной группы в метионине проводят сплавление с 30% гидроксидом натрия. Пробирку закрывают фильтровальной бумагой, смоченной раствором нитропруссида натрия. Продукты разрушения молекулы обнаруживаются по появлению красно-фиолетового окрашивания на бумаге (сероводород) и по запаху после подкисления (сероводород и меркаптан – резкий запах). При подкислении продукта реакции метионина серной кислотой окраска из красной переходит в красно-фиолетовую.

↑Запах меркаптана и сероводорода

Сероводород можно определить с ацетатом ртути. Выпадает черный осадок.

H₂S + Pb(CH₃COO)₂ → Pb₂S + 2CH₃COOH
Чистота

прозрачность и цветность водного и солянокислого раствора – оба они должны быть прозрачными и бесцветными
должны отсутствовать примеси солей аммония, мышьяка, цианидов (по реакции образования берлинской лазури)
в пределах эталона– хлориды, сульфаты, железо, сульфатная зола и тяжелые металлы.
потеря в массе при высушивании не более 0,5%

Количественное определение

ФС Йодометрический метод. Вариант обратного титрования.

Метод основан на окислении тиометильной группы йодом до сульфоксида.

Навеску предварительно растворяют в среде фосфатного буферного раствора (смеси однозамещенного фосфата калия и двузамещенного фосфата калия) и калия йодида. Затем добавляют избыток титрованного раствора 0,1н йода.

Остаток йода оттитровывают тиосульфатом натрия по индикатору крахмалу до исчезновения синего окрашивания:

ост. I₂ + Na₂S₂O₃ → 2NaI + Na₂S₄O₆

К стех. = 1/1= 1

0,1н р-р I₂ приготовлен с учетом условных частич (УЧ ½ I₂)

f экв = 1 · ½ = ½, или сера (II) окисляется до серы (IV).

М.э = ½ · М.м Т = Ст-та · М.э / 1000

С_% =	(V I₂· К I₂ - V Na₂S₂O₃· К Na₂S₂O₃ )· T I₂	· 100%
	а

Параллельно проводят контрольный опыт.

ФС метод Кьельдаля (см выше) После просветления раствора сжигание продолжают в течение 4—4,5 часов.
Алкалиметрический метод (вариант нейтрализации) только в смешанных растворителях (в среде органических растворителей: диметилформамида, ацетона, этилового и пропилового спиртов). Органические растворители подавляют ионизацию аминогрупп, это позволяет титровать препараты аминокислот водными растворами натрия гидроксида. Индикатор – тимоловый синий. f экв = 1

потенциометрическое титрование в среде неводного растворителя (смесь муравьиной и уксусной кислот) титрант хлорная кислота.
Йодхлорметрический метод (вариант обратного титрования) основан на окислении метионина до соответствующего сульфоксида:

К _стех. = 1/1 f _экв = 1/2, т.к. 0,1н раствор ICI приготовлен с учетом условных частиц (УЧ ½ ICI) или сера (II) окисляется до серы (IV).

М.э = М.м·½ Т = Ст-та · М.э / 1000
Хранение в хорошо укупоренной таре, в сухом, защищенном от света месте.

Применение заболевания и токсические поражения печени.

Аналоги лактама гамма-аминомасляной кислоты

ФП ГФ ХII Пирацетам (нооторопил)

Piracetam (Nootropil)

(2-Оксо-1-пирролидинил) ацетамид. Производное 2-пирролидона

Описание: белый кристаллический порошок.

Растворимость: легко растворим в воде, растворим в спирте, мало растворим в хлороформе.

Подлинность.

ФС ИК – спектр, снятый в диске с калия бромидом в области 4000 - 400 см^-1, по положению полос поглощения должен соответствовать рисунку спектра пирацетама.
ФС УФ – спектр в диапазоне 230-350 нм не имеет выраженных максимумов поглощения.
ФС Т°пл
ФС Реакция гидролиза с идентификацией продуктов. Из амидной группы выделяется аммиак, который определяют по запаху и посинению влажной красной лакмусовой бумажки.

5. Реакция окислительного дезаминирования с гипохлоритом натрия и фенолом при нагревании (ФС для идетификации и количественного определения методом фотометрии в лекарственных формах). Аммиак, образующийся в реакции, доказывают по образованию индофенола. Полученный индофенол окрашивает раствор в интенсивный синий цвет

NaOCl

NH₃↑

NaOCl

окисление

NH₃
- H₂O

- H₂⁺

фенол
n-Хинон n-Хинонимин

Индофенол (синее окрашивание)
6. Гидроксамовая реакция (как лактам и амид - по двум функциональным группам).
Чистота

1. Определяют прозрачность, цветность, рН, сульфатную золу, тяжелые металлы, микробиологическую чистоту.

2. Посторонние примеси методом ВЭЖХ со спектрофотометрическим детектором. Площадь любой примеси должна быть не более 0,1% площади пика раствора сравнения. Возможен метод ТСХ.
Количественное определение

Видоизмененный метод Кьельдаля – основан на кислотном или основном гидролитическом разложении лекарственных веществ по амидным группам. Фактор эквивалентности зависит от числа амидных групп.

1. ФС пирацетама - гидролитическое разложение в присутствии натрия гидроксида и дальнейшее определение образовавшегося аммиака по методу Кьельдаля. Метод основан на свойстве вещества гидролизоваться под действием натрия гидроксида с выделением аммиака. Определение проводят в установке Кьельдаля. Аммиак отгоняют и улавливают раствором борной кислоты, отгон титруют раствором хлороводородной кислоты по смешанному индикатору (метиловый красный в смеси с метиленовым синим).

f экв = 1

т.к. из 1 молек. вещества  1 молек. NH₃  1 молек. HCl
Хранение в хорошо укупоренной таре, в защищенном от света месте.

Применение Ноотропное средство (обменные процессы и кровообращение в мозге).

Препараты полиаминокарбоновых кислот (комплексоны)
НФП Тетацин кальция (кальция натрия эдетат)

Раствор тетацина-кальция 10% для инъекций

Solutio tetacini-calcii 10% pro injectionibus

Динатриево-кальциевая соль этилендиамин тетрауксусной кислоты
Получение

растворяя 100,0 высушенной динатриевой соли ЭДТУК этилендиаминтетрауксусной кислоты, 34,0 карбоната кальция и 8 мл разведенной хлороводородной кислоты в общем объеме до 1л.

Полученный раствор фильтруют, разливают в ампулы и стерилизуют. Идет взаимодействие по реакции:

Образовавшийся раствор должен иметь рН 5,0-7,0.
Описание: бесцветная прозрачная жидкость.

Подлинность

на ион натрия: капля препарата внесенная в бесцветное пламя горелки окрашивает его в желтый цвет.
на ион кальция: так как тетацин-кальций сравнительно малоустойчивое соединение, то ион кальция можно открыть реакцией с оксалатом аммония после подщелачивания раствором аммиака. сразу – образуется только муть (примесь- свободный кальций).

остаток ЭДТУК открывают по связыванию ионов свинца.

Константа нестойкости комплекса ЭДТА с ионами кальция больше, чем у ЭДТА с ионами свинца. Следовательно, ионы свинца будут замещать ионы кальция в комплексной соли с образованием более прочного комплекса:

При проведении качественной реакции к раствору тетацина-кальция добавляют раствор нитрата свинца, а затем раствор калия йодида,

не должно появляться желтого осадка йодида свинца:
Pb²⁺ +2KI → PbI₂↓
Если теперь добавить к этому раствору раствор оксалата аммония, то образуется белый осадок оксалата кальция (а не муть).
На этой же реакции основано и детоксицирующее действие препарата при отравлении свинцом, кобальтом, кадмием, иттрием, церием и др. При отравлении солями бария и стронция тетацин-кальций не применяют, так как комплекс их с ЭДТА еще более не устойчив, чем с кальцием.

1 2 3 4