- Лекарственное вещество Растворимость в воде Реакции
- Анализ лекарственных веществ II группы, УФ-спектры которых имеют максимумы поглощения
- Спектрофотометрия лекарственных веществ третьей группы
- Анализ веществ, УФ-спектры которых в 0,1 М HCl не имеют максимума поглощения
- Лекарственное вещество Не имеют максимума поглощения
- Три максимума
Химический анализ. Программа производственного контроля
 Скачать 1.45 Mb.
|
|
Анализ лекарственных веществ, УФ-спектры которых не имеют максимумов поглощения Из анализируемых соединений второй группы только 7 лекарственных веществ не имеют максимумов поглощения в ультрафиолетовой области:
Установление подлинности лекарственных веществ, не имеющих максимума поглощения, проводится химическим методом по реакции взаимодействия с солями тяжелых металлов (кобальта, меди и железа), а также с применением хроматографических методов и дифференциальной спектрофотометрии.
Если исследуемый образец представляет собой производное барбитуровой кислоты, наблюдается красно-фиолетовое пятно. Для дифференциации барбамила, барбитала-натрия и этаминала-натрия проовдият их исследование в тонком слое сорбента или методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. Тонкослойная хроматография производных барбитуровой кислоты К 10 мг препарата добавляют 0,1 г безводного натрия сульфата, 1 каплю 0,1 моль/л раствора кислоты хлористоводородной и 0,5 мл хлороформа. После перемешивания смеси 10 мкл хлороформного раствора наносятся капилляром или микрошприцем на пластинку с закрепленным слоем силикагеля, «Сорбфил» или «Силуфол» размерами 10 х 10 см или 10 х 15 см. параллельно на стартовую линию пластинки наносят по 10 мкл хлороформных растворов веществ свидетелей. После удаления растворителей пластинку помещают в хроматографическую камеру. Хроматографирование проводят восходящим методом в системе растворителей хлороформ-н-бутанол-25 % раствор аммония гидроксида (70:40:5). Длина пробега растворителей 8 – 10 см. после подъема растворителей пластинку вынимают из камеры, сушат и опрыскивают последовательно 0,02 % раствором дифенилкарбазона в хлороформе, а затем 2,5 % раствором ртути (II) сульфата. Идентификацию барбитуратов проводят по красно-фиолетовой окраске и значению Rf анализируемого вещества и веществ-свидетелей. Значение Rf барбитуратов представлены в таблице 4. Таблица 4 Значение Rf производных барбитуровой кислоты
Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) К 2 -3 кристалликам анализируемого вещества добавляют 100 мкл 40 % раствора ацетонитрила в фосфатном буфере (рН=6,1) и 2 – 3 мкл полученного раствора исследуют методом ВЭЖХ при следующих условиях:
Идентификация барбитуратов проводится по абсолютным временам удерживания в сравнении с веществами-свидетелями, время удерживания которых определяется при указанных выше условиях. В таблице 5 представлены абсолютные времена удерживания барбитуратов. Таблица 5 Времена удерживания производных барбитуровой кислоты
Дифференциальная спектрофотометрия 5 – 10 мг вещества растворяются в боратном буфере с рН = 10,2, аликвотная часть полученного раствора переносится в кварцевую кювету и снимается УФ-спектр полученного раствора в пределах 220 – 270 нм (спектральная кривая №1). В кювету добавляются 2 – 3 капли 30 % раствора натрия едкого и вновь снимается УФ-спектр раствора ( с рН = 13) в пределах 220 – 270 нм (спектральная кривая №2). Если анализируемое вещество является производным барбитуровой кислоты, то в спектральной кривой №1 отмечается максимум поглощения при 239 – 240 нм, а в спектральной кривой №2 – при 254 – 255 нм.
Для установления их подлинности необходимо провести испытание на растворимость и реакции на катионы и анионы (таблица 6) в соответствии с нормативной документацией (ГФ, ФС и др.). основными реакциями для дифференциации этих препаратов являются:
Таблица 6 Основные испытания для дифференциации лекарственных веществ, относящихся к II группе и являющихся солями органических кислот
Анализ лекарственных веществ II группы, УФ-спектры которых имеют максимумы поглощения После сравнения полученных спектров со спектрами лекарственных веществ-свидетелей для получения достоверного результата исследования следует провести следующие химические реакции:
К раствору вещества (15 – 20 мг в 2 мл воды) двух капель раствора железа хлорида наблюдается окрашивание от голубого (анальгин) до сине- и красно-фиолетового цвета (натрия салицилат и натрия n-аминосалицилат) или осадок розовато-желтого цвета (натрия бензоат). Дифференциация веществ, взаимодействующих в раствором железа (III) хлорида, проводится с учетом следующих характеристик:
Если анализируемое вещество не образует окрашивания с раствором железа (III) хлорида, то необходимо провести реакцию образования азокрасителя. Образование осадка от желто-оранжевого до оранжево-красного цвета свидетельствует о наличии первичной ароматической группы в структуреанализируемого вещества. Такая функциональная группа характерна для структуры сульфаниламидных препаратов, к числу которых относятся норсульфазол-натрий, сульфацил-натрий и этазол-натрий. Отличить эти препараты друг от друга возможно по следующим характеристикам:
Из числа анализируемых веществ смешанной группы только стрептоцид растворимый не взаимодействует с раствором железа (III) хлорида и не образует азокраситель. Для доказательства этого препарата вначале следует провести гидролиз с раствором кислоты хлористоводородной, а затем 1 мл охлажденного раствора используют для доказательства ароматической первичной аминогруппы. Спектрофотометрия лекарственных веществ третьей группы Спектры анализируемых веществ третьей группы в 0,1 моль/л кислоты хлористоводородной снимают при условиях, представленных при анализе веществ второй группы. В таблице 7 представлены максимумы поглощения лекарственных веществ органической структуры. Анализ веществ, УФ-спектры которых в 0,1 М HCl не имеют максимума поглощения Эту группу образуют барбитал, бромизовал, гексаметилентетрамин, глюкоза, кислота глютаминовая, метионин и фенобарбитал. Дифференциация этих веществ проводится следующим образом:
Положительная нингидриновая проба характерна для аминокислот – кислоты глютаминовой и метионина. Отличить эти два препарата можно по результатам следующих реакций:
К охлажденному сплаву добавляют 5 мл воды и смесь подкисляют кислотой серной разведенной. Ощущается запах сероводорода и меркаптана.
Эта реакция проводится для обнаружения альдегидов (глюкоза) и веществ, из которых при определенных условиях (нагревании с кислотой) образуются соединения, содержащие альдегидную группировку (гексаметилентетрамин). К 5 – 10 мг вещества, помещенным в фарфоровую чашечку, добавляют 5 – 10 мг тимола (или резорцина), 3 – 5 капель кислоты серной концентрированной и смесь нагревают на кипящей водяной бане. Наблюдается розово-красное окрашивание. Таблица 7 Спектральные характеристики лекарственных веществ органической структуры в 0,1 моль/л растворе кислоты хлористоводородной
Из веществ III группы, не поглощающих в УФ-области спектра, к числу альдегидов и альдегидообразующих веществ, относятся глюкоза и гексаметилентетрамин. Необходимо отметить, что из веществ этой подгруппы только эти соединения легко растворимы в воде.
Температура плавления бромизовала составляет 145 – 150 °С. Кроме того, бромизовал может быть идентифицирован методом ВЭЖХ при условиях хроматографирования, представленных при анализе барбитуратов. Время удерживания бромизовала составляет 4,3 минут. |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||