- ИНФОРМАЦИЯ К ЗАНЯТИЮ Медицинские иммунобиологические препараты для профилактики и лечения инфекционных болезней
- Инактивированные (неживые, убитые) корпускулярные (цельноклеточные или цельновирионные) вакцины
- Химические
- Консервация и контроль качества вакцин.
- Контроль качества противовирусных вакцин.
- Прививки по экстренным эпидемическим показаниям
- Таблица 14. Календарь профилактических прививок России
- Иммунные сыворотки и иммуноглобулины
- Гетерологичные антитоксические лечебно-профилактические сыворотки
- Диагностические иммунобиологические препараты Диагностикумы
- Диагностические сыворотки
- САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ
- Педиатрические аспекты темы
Общая микробиология. Министерство здравоохранения РФ ярославская государственная медицинская академия
 Скачать 15.54 Mb.
|
Перечень конкретных учебно-целевых вопросов
ИНФОРМАЦИЯ К ЗАНЯТИЮ Медицинские иммунобиологические препараты для профилактики и лечения инфекционных болезней Медицинские биологические препараты для профилактики и лечения инфекционных болезней подразделяются на следующие группы. Вакцины и анатоксины Вакцины – это препараты из различных живых, инактивированных микроорганизмов или из их антигенных компонентов, которые используются для активной иммунизации людей с профилактическими и лечебными целями. Живые вакцины изготавливают на основе аттенуированных (ослабленных) штаммов микроорганизмов. В настоящее время применяются живые вакцины: вакцина против туберкулеза (БЦЖ – BCG – Bacteria Calmett-Geren), чумы, сибирской язвы, туляремиии, бруцеллеза, полиомиелита, сыпного тифа, лихорадки Ку, эпидемического паротита, кори, желтой лихорадки, гриппа. Инактивированные (неживые, убитые) корпускулярные (цельноклеточные или цельновирионные) вакцины изготавливают из типичных вирулентных штаммов микроорганизмов (бактерий или вирусов), реже из аттенуированных (ослабленных) штаммов путем химической (формалин, спирт, фенол) или физической (тепло, ультрафиолетовое облучение, радиация) инактивации. К этой группе относятся АКДС (адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная с инактивированным коклюшным компонентом) вакцина, вакцины против клещевого энцефалита, холеры, гриппа, бешенства, гепатита А, полиомиелита, лептоспироза, синегнойной инфекции. Химические (субклеточные или субвирионные) вакцины представляют собой иммуногенные компоненты, извлеченные из микробной клетки с помощью физико-химических методов. К ним относятся менингококковая полисахаридная вакцина, вакцина брюшнотифозная из Vi-антигена, гриппозная тривалентная полимер-субъединичная вакцина с иммуномодулятором полиоксидонием (Гриппол). Нередко к этим вакцинам добавляют вещества, удлиняющие время всасывания антигена, в частности, гидроксид алюминия, алюминиево-калиевые квасцы, и др. Рекомбинантные вакцины создают с помощью генно-инженерной технологии, встраивая в геном вектора (дрожжи, кишечная палочка или вакцинный вирус, например, вирус осповакцины) ген чужеродного антигена (например, вируса гепатита В). После завершения культивирования вектора выделяют иммуногенный белок (HbsAG), подвергают его очистке и используют для профилактики гепатита В. Анатоксины представляют собой бактериальные экзотоксины, обезвреженные формалином. Для обезвреживания к экзотоксину (фильтрату токсигенной культуры микроорганизма) добавляют 0,3— 0,4% формалина и выдерживают его при 370 С от 18 до 32 дней. При этом токсин утрачивает токсичность, но сохраняет его антигенность и иммуногенность. С целью снижения реактогенности анатоксины очищают от балластных веществ, концентрируют для уменьшения объема вводимого препарата, а затем сорбируют на гидроксиде алюминия с целью повышения иммуногенности. Для профилактики и лечения инфекций выпускаются стафилококковый, адсорбированный дифтерийный, адсорбированный дифтерийно-столбнячный, адсорбированный столбнячный, синегнойный, ботулинистический анатоксины. Вакцины вводят различными путями - накожно (против оспы, туляремии), внутрикожно (БЦЖ), подкожно (против кишечных инфекций), энтерально (живая вакцина против полиомиелита), на слизистую оболочку носа (против гриппа), аэрогенно и комбинированными методами. В последнее время используют безыгольный внутрикожный метод. Живые вакцины вводят чаще однократно (против паротита, кори) или с последующей ревакцинацией (БЦЖ, против полиомиелита). Убитые вакцины и анатоксины вводят 2—3 раза, химические вакцины, как правило, однократно. Вакцины применяют главным образом для профилактики инфекционных болезней. Для лечебных целей вакцины используют при хронических, вяло протекающих заболеваниях: фурункулез и другие стафилококковые инфекции, хроническая гонорея, бруцеллез и др. с целью стимуляции иммунной системы и десенсибилизацией организма. В медицинской практике применяются следующие убитые лечебные вакцины: стафилококковая, бруцеллезная, гонококковая, стафило-протейно-синегнойная, герпетическая, синегнойная, протейная, анатоксины стафилококковый, синегнойной палочки. Консервация и контроль качества вакцин. Убитые вакцины консервируют добавлением 0,25% фенола или мертиолата в соотношении 1:10 000. Живые вакцины стабилизируют путем лиофильной сушки (высушивание из замороженного состояния в условиях вакуума). Вакцины хранят в запаянных ампулах или флаконах с этикетками, на которых указываются институт, изготовивший вакцину, название, серия вакцины, номер государственного контроля, срок годности. Срок годности устанавливают для каждого вида вакцины отдельно. Сухие вакцины (лиофилизированные) имеют больший срок годности, чем жидкие. Срок годности анатоксина 1—3 года. Хранят вакцины в сухом, защищенном от света месте при температуре 2—10 С. Перед употреблением сухую вакцину разбавляют изотоническим раствором хлорида натрия или дистиллированной водой с соблюдением всех правил асептики. Количество жидкости, добавляемой к вакцине, должно быть указано в прилагаемом к вакцине наставлении. Изменение нормального внешнего вида (цвета, степени мутности), наличие плесени, посторонних частиц, комочков, не разбивающихся при встряхивании, нарушение целостности ампулы или флакона, отсутствие этикетки свидетельствуют о непригодности вакцины к употреблению. Сухая вакцина, не образующая при растворении равномерной взвеси, также не пригодна к употреблению. Все вакцины проходят государственный контроль. Убитые, химические вакцины и анатоксины проверяют на стерильность путем посева в асептических условиях 0,5 мл вакцины на МПБ, сусло и среду Китта — Тароцци с последующим выращиванием посевов в термостате при 370 С в течение 5-8 суток. Отсутствие роста на питательных средах свидетельствует о стерильности вакцины. Безвредность вакцин проверяют путем подкожного введения белым мышам 0,5 мл препарата. Выживание животных в течение 3 дней свидетельствует о безвредности вакцины. Иммуногенность вакцин проверяют путем иммунизации чувствительных к данному заболеванию животных с последующим заражением их смертельной дозой соответствующей живой культуры. Процент выживших животных указывает на степень иммуногенности (60— 80—100% выживаемости). Корпускулярная вакцина стандартизуется по содержанию определенного количества микробных клеток в 1 мл. Активность анатоксина определяют по его способности реагировать со специфической антитоксической сывороткой с помощью реакции флоккуляции. Сущность реакции заключается в том, что при смешивании токсина или анатоксина в определенных соотношениях с антитоксической сывороткой (антитоксином) образуется помутнение с выпадением рыхлого осадка. При строгом соответствии количества сыворотки и антигена реакция флоккуляции наступает раньше (так называемая начальная флоккуляция). Эта реакция применяется и для титрования противодифтерийной сыворотки. Контроль качества противовирусных вакцин. Помимо общих для всех вакцин методов контроля, противовирусные вакцины должны контролироваться на отсутствие онкогенных свойств, обусловленных онкогенами и онкогенными вирусами, для чего заражают лабораторных животных и куриные эмбрионы. Контролируют также культуры тканей, применяющиеся для накопления вирусного материала. В качестве таких культур используют диплоидные клетки фибробластов, выращенных из тканей легких эмбриона человека. Клетки культивируют в специальных банках клеток, которые состоят из ряда ампул, содержащих клетки с установленной генеалогией, характеристиками роста и жизнеспособности, кариологическими показателями. У клеток должен отсутствовать признак прививаемости. Используют также клетки животных и птиц (кур, кроликов, обезьян), для чего животных разводят в закрытых колониях, свободных от присущих им патогенных агентов. Клетки, полученные от животных из таких колоний, не должны содержать вирусов-контаминантов. Обязательно контролируется качество питательных сред, используемых для получения культуры клеток. В этих средах должны отсутствовать бактерии, грибы, микоплазмы и посторонние вирусы. Для стерилизации сред рекомендуют использовать гамма-облучение. Вакцинопрофилактика инфекционных болезней в России проводится в рамках плановых прививок и прививок по эпидемическим показаниям. Плановые прививки проводятся во всех регионах страны в соответствии с календарем профилактических прививок (вакцинация против гепатита В, туберкулеза, полиомиелита, коклюша, дифтерии, столбняка, гемофильной инфекции, кори, эпидемического паротита, краснухи – табл. 14). Проводятся также плановые прививки населению на территориях, эндемичных по природно-очаговым и зоонозным инфекциям, группам с высоким риском заражения. Прививки по экстренным эпидемическим показаниям предусмотрены в случае контакта восприимчивых (непривитых) лиц с источником инфекции. Сюда относятся прививки против гриппа, менингококковой инфекции, особо опасных инфекций, прививки в очагах инфекции, а также экстренная профилактика столбняка, бешенства. Группы населения, подлежащие вакцинации при возникновении неблагоприятной эпидемической обстановки, определяют органы управления здравоохранения субъектов России. Таблица 14. Календарь профилактических прививок России
Примечание: подчеркнута первичная вакцинация Иммунные сыворотки и иммуноглобулины Иммунные сыворотки подразделяют на лечебно-профилактические и диагностические. Лечебно-профилактические сыворотки получают из крови гипериммунизированных лошадей или других животных, у которых можно взять сравнительно большое количество крови. Диагностические сыворотки обычно получают из крови иммунизированных кроликов. Гетерологичные антитоксические лечебно-профилактические сыворотки получают путем многократной подкожной или внутривенной иммунизации животных (обычно лошадей) анатоксинами или микроорганизмами, вырабатывающими токсин в возрастающих дозах. После окончания иммунизации у животного стерильно берут кровь, из которой получают сыворотку. Сыворотку проверяют на активность (титр антител), стерильность, безвредность, количество белка, прозрачность. Нативные сыворотки содержат балластные белки, которые при введении человеку могут вызвать осложнения, поэтому их готовят в очищенном и концентрированном виде. Для этого полученные нативные сыворотки осаждают сульфатом аммония, подвергают очистке от балластных веществ путем ферментирования и диализа (метод «Диаферм-3»), концентрируют и титруют на наличие антитоксических антител. Активность антитоксических сывороток выражают в антитоксических или международных единицах (АЕ, МЕ) по ее способности нейтрализовать определенное количество токсина в опытах на животных. Например, для противодифтерийной сыворотки антитоксическая единица — это наименьшее количество сыворотки, которое нейтрализует 100 DLM дифтерийного токсина для морской свинки; 1 DLM — наименьшее количество токсина, которое вызывает гибель морской свинки массой 250 г при подкожном введении. В настоящее время выпускаются противодифтерийная, противогангренозная, противостолбнячная, противоботулинистическая антитоксические лечебно-профилактические сыворотки. Сыворотку вводят чаще внутримышечно или внутривенно. Перед употреблением ее подогревают на водяной бане до температуры 36—370С. Введение чужеродного белка может вызвать тяжелые реакции. Поэтому сыворотку вводят по методу Безредки с проверкой индивидуальной чувствительности больного к белку данной сыворотки. Для этого 0,1 мл сыворотки лошади, разведенной 1:100, вводят внутрикожно в ладонную поверхность предплечья. У людей с повышенной чувствительностью возникает аллергическая реакция, которая выражается в появлении папулы и гиперемии на месте введения через 20 мин после инъекции. При отрицательной реакции с целью десенсибилизации вводят 0,1 мл неразведенной сыворотки, а через 30—60 мин при отсутствии аллергических явлений — всю назначенную дозу. Иммуноглобулины. Эти препараты представляют собой иммунологически активные белковые фракции сыворотки крови (иммуноглобулины класса G – около 95%, класса М – около 3-5%), выделенные путем фракционирования сывороточных белков спиртом на холоду. Иммуноглобулины получают из сыворотки крови неиммунизированных доноров (нормальный донорский или противокоревой иммуноглобулин), иммунизированных доноров (гомологичные специфические иммуноглобулины), а также из сыворотки крови иммунизированных животных (гетерологичные специфические иммуноглобулины). Период полувыведения иммуноглобулинов из организма человека составляет около 4 недель, а максимальный уровень антител в крови после внутримышечного введения достигается через 24-48 часов. Иммуноглобулины человека относятся к слабореактогенным препаратам, используются для экстренной профилактики и лечения инфекционных болезней. Нормальный донорский иммуноглобулин получают из крови не менее чем 1000 человек, концентрируя препарат в процессе производства. В препарате содержится высокий уровень антител к возбудителям многих заболеваний (корь, коклюш, грипп, полиомиелит, гепатит и т.д.) в результате предшествующих инфекций или прививок. Из сыворотки крови иммунизированных доноров изготавливают специфические иммуноглобулины против гепатита В, гриппа, клещевого энцефалита, стафилококковых инфекций, столбняка, бешенства (антирабический), против коклюша, а также иммуноглобулин, обогащенный IgM для орального применения при кишечных инфекциях. Выпускаются также препараты крови и иммуноглобулины человека для внутривенного введения, предназначенные для лечения инфекционных болезней (антистафилококковая плазма, антипротейная плазма, антисинегнойная плазма, иммуноглобулин человека нормальный, иммуноглобулин для внутривенного введения, иммуноглобулин человека антистафилококковый, иммуноглобулин человека противоботулинистический, иммуноглобулин человека противодифтерийный). К гетерологичным иммуноглобулинов относятся препараты против бешенства, венесуэльского энцефаломиелита лошадей, клещевого энцефалита, лептоспироза, лихорадки Эбола, японского энцефалита, сибирской язвы. Сыворотки и иммуноглобулины создают кратковременный искусственный пассивный иммунитет и применяются для экстренной профилактики и лечения инфекционных болезней. Аллергены. В практике здравоохранения инфекционные и неинфекционные аллергены используют как для специфической диагностики заболеваний, так и для их специфической иммунотерапии. Аллергены применяют с целью выявления иммунологической перестройки организма в результате вакцинации или заболевания, а также для определения чувствительности больного к определенным лекарственным средствам. Основные требования к аллергенам — высокая чувствительность и специфичность. Микробные аллергены готовят из фильтратов бульонных культур (туберкулин, бруцеллин, гистоплазмин) или из клеток микроорганизмов аналогично химическим вакцинам. Их контролируют и хранят аналогично другим бактериальным препаратам. Инфекционные аллергены представлены аллергенами грибов, условно-патогенных и патогенных микроорганизмов. Аллергодиагностика инфекционных болезней основана на способности кожи человека, сенсибилизированного к аллергену определенного микроорганизма, реагировать на его внутрикожное введение развитием аллергической реакции. Аллергены наиболее часто вводят накожно (проба Пирке), внутрикожно (проба Манту) в объеме 0,1 мл в ладонную поверхность предплечья или методом укола - прик-тесты, а также провокационные тесты. При положительной реакции на месте нанесения аллергена наблюдается покраснение и припухлость. В последние годы в практику внедрены препараты для сухого прик-теста, представляющие собой металлические ланцеты с фиксированным на них сухим стандартизованным аллергеном. Все диагностические кожные аллергические реакции учитываются через 20 минут (реакция немедленного типа) и через 24-48 часов (реакция замедленного типа). Диагностика аллергии может осуществляться также с помощью реакций in vitro (радиоаллергосорбентный, радиоиммунный тесты, иммуноблотинг, иммуноферментный анализ, реакция торможения миграции лейкоцитов - РТМЛ, тест ППН - показатель повреждения нейтрофилов). Бактериальные аллергены, как правило, используются для диагностики, реже – для специфической иммунотерапии различных хронических и рецидивирующих инфекционно-аллергических заболеваний (инфекционно-аллергическая форма бронхиальной астмы, хроническая пневмония, хронические тонзиллит, отит, синусит, бронхоэктатическая болезнь, полиартриты, энтериты, гастриты и т.д.). Бактериальные аллергены представляют собой белковые термостабильные фракции бульонных культур соответствующих видов микроорганизмов, полученные путем осаждения уксусной кислотой с последующим растворением осадка боратно-солевым буфером. Аллергены стандартизуются по белковому азоту. С целью диагностики бактериальные аллергены вводят внутрикожно. В практических целях наибольшую значимость имеет применение аллергенов с целью постановки кожных аллергических проб для диагностики туберкулеза, бруцеллеза, туляремии, сибирской язвы. Грибковые аллергены представляют собой водно-солевые растворы гликопротеидов мицелия грибов. Стандартизуются эти препараты по белковому азоту и применяются в диагностических целях для постановки внутрикожных аллергических проб при кандидамикозах, плесневых и некоторых других микозах. Диагностические иммунобиологические препараты Диагностикумы представляют собой взвесь убитых бактерий стандартной концентрации в физиологическом растворе, применяемые в качестве корпускулярного антигена в реакции агглютинации с целью определения наличия и титра антител в крови больного. В настоящее время выпускается широкий спектр диагностикумов - брюшнотифозные O и H, паратифозные A и B, бруцеллезный, туляремийный и др. Эритроцитарные диагностикумы - это взвесь эритроцитов барана в физиологическом растворе, на которых адсорбированы антигены, полученные из бактерий, риккетсий, вирусов (или сами вирусы). Применяется в РНГА для выявления антител при дизентерии Флекснера и Зонне, сыпном тифе, различных вирусных инфекциях и др. Имеются также различные антигены для РСК - растворы молекулярных антигенов из бледных трепонем, из риккетсий Провачека, из бактерий коклюша и др., применяемые для установления титра антител в крови у больных соответствующими инфекциями. Диагностические сыворотки получают обычно путем иммунизации кроликов соответствующими микроорганизмами, антигенами из них или токсинами. Агглютинирующие сыворотки (например, против сальмонелл, шигелл разных видов и других микроорганизмов) применяются для идентификации микроорганизма по антигенным свойствам с помощью реакции агглютинации. Преципитирующая сибиреязвенная сыворотка применяется для идентификации полисахаридного антигена бацилл сибирской язвы с помощью реакции преципитации. Люминесцирующие сыворотки представляют собой меченые флюорохромом (обычно изотиоцианатом флюоресцеина) антитела против возбудителей различных инфекций (чумы, туляремии, сибирской язвы, бруцеллеза, холеры, вирусов гриппа, парагриппа, аденовирусов и др.). Применяются в реакции иммунофлюоресценции для выявления возбудителей инфекции или их антигенов в материале от больного. САМОСТОЯТЕЛЬНАЯ РАБОТА СТУДЕНТОВ
Педиатрические аспекты темы
|